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狂犬病、破傷風人免疫血漿抗體效價檢測分析

發布時間:2020-02-13所屬分類:醫學職稱論文瀏覽:1

摘 要: 摘要:為了解原料血漿中抗體水平,為狂犬

  摘 要:為了解原料血漿中抗體水平,為狂犬病、破傷風抗體效價測定提供依據,同時為提高血漿站的抗體效價提供依據,進而提高狂免、破免產品的生產質量,本文對2015—2017年血漿站的狂犬病、破傷風抗體效價檢測結果進行三年數據對比,采用ELISA法檢測人血漿中狂犬病、破傷風的抗體效價,用柱狀圖分析各血漿站抗體效價9IU/mL以上、6~9IU/mL血漿所占百分比。結果表明,破免血漿檢測量逐年增多,2017年比2015年增長了103%,其中高效價血漿量也在逐年上升。狂免血漿檢測量2016年和2017年均比2015年下降了32%,其中高效價的血漿量逐年降低。

狂犬病、破傷風人免疫血漿抗體效價檢測分析

  關鍵詞:狂犬病;破傷風;抗體效價;ELISA法

  破傷風是由破傷風桿菌侵入人體傷口造成的一種特異性感染,是致死性傳染病,其高毒力的痙攣毒素可阻斷中樞神經系統的抑制性神經遞質,引起肌肉強直和典型的全身痙攣[1]。破傷風抗毒素(TAT)是由馬血清制成的,部分人會出現過敏反應,而破傷風人免疫球蛋白(TIG)是人血制品,基本沒有過敏反應。破傷風人免疫球蛋白主要用于預防和治療破傷風,尤其適用于對破傷風抗毒素(TAT)有過敏反應者。

  狂犬病毒轉移的發生起源于被感染宿主的傷口,引起咬傷傷口處唾液病毒的沉積。一旦感染發展,而沒有有效的治療,具有接近100%的致死率。但是,在被咬傷暴露傷口之前或在傷口暴露后很短時間內給予疫苗的注射,能有效避免這種結果的發生[2]。狂犬病人免疫球蛋白主要用于被狂犬或其他瘋動物咬傷、抓傷患者的被動免疫。

  疫苗和免疫球蛋白是相輔相成的作用,疫苗屬于抗原,通過刺激機體產生抗體后起到有效的防護作用,需要較長時間產生抗體,但效力持久;免疫球蛋白屬于抗體,能快速起效但效力較短。近年來,臨床對血液制品的需求持續攀升,國內血液制品行業無論是原料血漿采集量,還是血液制品產量、品種都在逐年增長[3]。2017年狂免、破免產品簽發情況見表1。

  了解各漿站原料血漿的狂犬病/破傷風抗體效價水平,是制備用于預防和治療狂犬病/破傷風的人免疫球蛋白產品的前提[4]。為了解疫苗接種者血清中狂犬/破傷風抗體水平,以評價血漿站的預防接種效果,現對各漿站2015—2017年狂犬疫苗/破傷風疫苗接種者進行血清抗體測定,為漿站提高抗體效價提供依據。

  1材料與方法

  1.1血漿樣品

  由武穴武源單采血漿站、鄖陽單采血漿站、武生松滋單采血漿站、武生云夢單采血漿站、湖南君山單采血漿站提供。

  1.2試劑、儀器設備

  人狂犬病病毒IgG抗體測定試劑盒(寧波天潤生物藥業有限公司、泰安京泰生物技術有限公司生產)、破傷風IgG抗體測定試劑盒(寧波天潤生物藥業有限公司、泰安京泰生物技術有限公司生產),試劑盒均為合格品并在有效期內使用。OpsysMR酶標儀(DYNEXTechnologies,Inc.),PW-960型洗板機(深圳市匯松科技發展有限公司),CU-600型電熱恒溫水槽(武漢恒豐中欣生物科技發展有限公司)。

  1.3檢測方法

  采用ELISA法,按照試劑盒說明書操作,陰性對照OD值≤0.1時,試驗成立。空白對照位置:A1;陰性對照位置:A6;9IU/mL陽性對照位置:A2、A3;6IU/mL陽性對照位置:A4、A5。9IU/mL陽性對照稀釋:稀釋液10µL+陽性對照90µL;6IU/mL陽性對照稀釋:稀釋液40µL+陽性對照60µL;樣品稀釋:稀釋液100µL+樣品5µL。酶標板讀板結果判定:OD值≥(A2+A3)/2,抗體效價≥9IU/mL;(A4+A5)/2≤OD值<(A2+A3)/2,6IU/mL≤抗體效價<9IU/mL;OD值<(A4+A5)/2,抗體效價<6IU/mL。

  1.4分析方法

  根據檢測數據,采用柱狀圖對各漿站破傷風、狂犬病人免疫血漿抗體效價進行分析,主要對9IU/mL以上、6~9IU/mL的高效價血漿所占百分比進行三年的對比。

  2結果與分析

  2.1特異性免疫血漿效價檢測總數分析

  2015—2017年特免血漿檢測數據見表2。從表2中可以看出,破免血漿檢測總量呈逐年上漲的趨勢,高效價血漿所占百分比也在逐漸增高,破傷風免疫情況逐漸提高。狂免血漿2016年和2017年檢測總數均比2015年下降了32%,高效價血漿所占百分比也在逐漸降低,這是由于接種疫苗時間長了免疫效果下降導致的,需要進行狂犬疫苗的加強免疫。

  2.2狂犬病特免血漿抗體效價檢測結果分析

  對比武穴、鄖陽、松滋、云夢漿站三年狂免血漿檢測的數據,結果見表3。

  武穴和鄖陽的狂犬血漿檢測總數多于松滋和云夢,對幾個漿站狂犬抗體效價9IU/mL以上、6~9IU/mL的高效價血漿所占百分比進行三年的對比,結果見圖1、圖2,從圖中可以看出,武穴和鄖陽高效價血漿所占百分比多于松滋和云夢,說明武穴和鄖陽狂犬免疫效果較好。

  2.3破傷風特免血漿抗體效價檢測結果

  對比君山、松滋、云夢漿站破免血漿三年檢測總數,結果見表4。

  君山的破傷風血漿檢測總數多于松滋和云夢,對幾個漿站破傷風抗體效價9IU/mL以上、6~9IU/mL的高效價血漿所占百分比進行三年的對比,結果見圖3、圖4,從圖中可以看出,君山高效價血漿所占百分比多于松滋和云夢,說明君山的破傷風免疫效果較好。

  3討論

  從以上數據和柱狀圖可以看出:破免收漿量逐年增多,2017年比2015年增長了103%,原因是目前破免價格放開,刺激生產廠家增加投產,破免制品價格提高,預計各企業會增加產量。雖然狂免收漿量降低,但是隨著經濟的增長和狂犬病預防門診規范處置程度的提高,狂免產品的需求應該會進一步增長。武穴和鄖陽漿站高效價狂免血漿較多,君山漿站高效價破免血漿較多,武穴、鄖陽、君山三個漿站的采漿量較高,高效價血漿所占百分比也較多。

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  狂犬病、破傷風疫苗常規免疫后進行抗體檢測十分重要,特別是對暫未產生抗體者,應及時加強免疫,確保免疫效果[5]。為了采集更多的高效價原料血漿制備出安全有效的狂犬病、破傷風人免疫球蛋白制品,使之取之于民、用之于民,建議漿站增大宣傳工作,動員更多的獻漿員,同時主動嚴格執行免疫程序,提高回采率,爭取多收獲高效價血漿。

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