發(fā)布時(shí)間：2020-01-02所屬分類：醫(yī)學(xué)論文瀏覽：1次
摘 要： 摘 要：對(duì)不同產(chǎn)地的馬齒莧的質(zhì)量進(jìn)行分析與評(píng)價(jià)。以貴州、四川、北京、西安四個(gè)產(chǎn)地的馬齒莧藥材為研究對(duì)象，對(duì)其水溶性浸出物、醇溶性浸出物進(jìn)行檢查。馬齒莧中水溶性浸出物 19.7%~35.7%之間、醇溶性浸出物在 10.8%~17.0%之間;采用紫外分光光度法測(cè)定馬齒
摘 要：對(duì)不同產(chǎn)地的馬齒莧的質(zhì)量進(jìn)行分析與評(píng)價(jià)。以貴州、四川、北京、西安四個(gè)產(chǎn)地的馬齒莧藥材為研究對(duì)象，對(duì)其水溶性浸出物、醇溶性浸出物進(jìn)行檢查。馬齒莧中水溶性浸出物 19.7%~35.7%之間、醇溶性浸出物在 10.8%~17.0%之間;采用紫外分光光度法測(cè)定馬齒莧藥材中多糖和總黃酮含量。多糖含量在 3.54%~9.98%之間，總黃酮含量在 0.77%~0.97%之間。不同產(chǎn)地馬齒莧質(zhì)量差異較大。
關(guān) 鍵 詞：馬齒莧;產(chǎn)地;多糖;總黃酮
馬齒莧(Purslane)為馬齒莧科(Portulacaceae)馬齒莧屬(Portulaca)的干燥地上部分，全草入藥，具有清熱解毒、涼血止血的功效。現(xiàn)代藥理研究表明，馬齒莧在抗菌、抗衰老、降血脂、降血糖等方面發(fā)揮著重要的藥理活性作用，臨床上常用預(yù)防高血壓、冠心病、糖尿病等常見疾病[1]。馬齒莧不僅可入藥，還是人們喜愛的食材，為天然野生佳蔬。
馬齒莧的化學(xué)組成復(fù)雜多樣，主要有多糖、黃酮、生物堿、萜類、揮發(fā)油等化學(xué)成分[2]。其中，馬齒莧的主要活性成分黃酮和多糖因含量高、作用廣，受到眾多科研工作者的關(guān)注，但研究?jī)?nèi)容主要集中在有效成分的提取、藥理及藥效等方面[3-7]。馬齒莧跨地區(qū)的質(zhì)量分析鮮有報(bào)道。
對(duì)于馬齒莧的質(zhì)量控制，2015 版《中國(guó)藥典》僅對(duì)馬齒莧藥材的性狀鑒別、顯微鑒別、薄層鑒別、水分檢查做了規(guī)定，未對(duì)其有效成分及其質(zhì)量控制進(jìn)行記載[8]。
為了更加科學(xué)客觀的評(píng)價(jià)馬齒莧藥材的質(zhì)量，在完成藥典規(guī)定項(xiàng)目的基礎(chǔ)上，本文對(duì)四川、貴州、北京、西安四產(chǎn)地的馬齒莧藥材進(jìn)行浸出物檢查，并以藥理作用明確的活性成分多糖和黃酮成分作為指標(biāo)成分，進(jìn)行含量測(cè)定，對(duì)馬齒莧藥材進(jìn)行質(zhì)量分析，為馬齒莧藥材的進(jìn)一步研究與開發(fā)和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的修訂提供一定的科學(xué)依據(jù)。
1 實(shí)驗(yàn)部分
1.1 儀器
Cary60 紫外-可見分光光度計(jì)(安捷倫科技有限公司)、GR-202 型分析天平(日本 AND 公司)、 MD 100-2 型上皿電子天平(上海天平儀器廠)、 MH-500 調(diào)溫型電熱套(北京科偉永興儀器有限公司)、KQ5200DE 型超聲提取儀(昆山市超聲儀器有限公司)、SHZ-D 循環(huán)水式真空泵(鞏義市予華儀器有限公司)、恒溫水浴鍋(河北省黃驊航天儀器廠)、恒溫鼓風(fēng)干燥箱(上海瑯 實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公 玕司)。
1.2 材料
葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品(批號(hào)：110833-201205，中國(guó)食品 藥 品 檢 定 研 究 院 ) 蘆 丁 標(biāo) 準(zhǔn) 品 ( 批 號(hào) ： 10080-200707，中國(guó)藥品生物制品檢定所)、乙醇(天津市河?xùn)|區(qū)紅巖試劑廠，分析純)、石油醚(天津市河?xùn)|區(qū)紅巖試劑廠，分析純)、苯酚(分析純，西安化學(xué)試劑廠)、濃硫酸(分析純，西安化學(xué)試劑廠)、亞硝酸鈉(天津市巴斯夫化工有限公司)、硝酸鋁(西安化學(xué)試劑廠，分析純)、氫氧化鈉(開封東大化工有限公司試劑廠，分析純)、實(shí)驗(yàn)用水為蒸餾水、馬齒莧藥材(批號(hào)：2013.08.20 產(chǎn)地：貴州 、四川、北京、西安)。
2 實(shí)驗(yàn)方法
2.1 鑒別[8]
取本品粉末 2 g，加水 2 mL，加甲酸調(diào)節(jié) pH 值至 3~4，冷浸 3 h，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀?5 mL 使溶解，作為供試液。另取馬齒莧對(duì)照藥材 2 g，同法制成對(duì)照藥材溶液，照薄層色譜法試驗(yàn)。
吸取上述兩種溶液各 1~2 μL，分別點(diǎn)樣于同一硅膠 G 薄層板上，以飽和正丁醇-冰醋酸-水(4:1:1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以 0.2% 茚三酮乙醇溶液，在 110 ℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。按照 2015 版四部薄層色譜法分析，在與馬齒莧對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上顯相同顏色的斑點(diǎn)，二者具有相同的色譜行為，結(jié)果見圖 1。
2.2 浸出物測(cè)定
按照《中國(guó)藥典》2015 版四部浸出物測(cè)定法項(xiàng)下的熱浸法(通則 2201)，對(duì)馬齒莧進(jìn)行藥材水溶性和醇溶性浸出物的含量測(cè)定。
2.2.1 水溶性浸出物測(cè)定
取供試品約 1.0 g，精密稱定，置 50 mL 具塞錐形瓶中，精密加水 25 mL，密封稱重定量，靜置 1 h后，連接回流冷凝管，加熱至沸騰，并保持微沸 1 h，放冷后，取下錐形瓶，密塞，再稱定重量，用水補(bǔ)足減失的重量，搖勻，用干燥濾器濾過(guò)，精密量取濾液 10 mL，置已干燥至恒重的蒸發(fā)皿中，在水浴上蒸干后，于 105 ℃干燥 3 h ，置干燥器中冷卻 30 min，迅速精密稱定重量。除另有規(guī)定外，以干燥品計(jì)算供試品中水溶性浸出物的含量(公式(1))，結(jié)果見表 1。
浸出物含量(%)=(W3-W1)×25/(10×W2)× 100%
2.2.2 醇溶性浸出物測(cè)定
以 75%乙醇(v/v)溶液代替蒸餾水為溶劑，照水溶性浸出物測(cè)定法測(cè)定，結(jié)果見表 1。以 75%乙醇(v/v)溶液代替蒸餾水為溶劑，照水溶性浸出物測(cè)定法測(cè)定，結(jié)果見表 1。
2.3 馬齒莧多糖的含量測(cè)定[9]
2.3.1 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備
精密稱取 105 ℃干燥至恒重的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品適量，加蒸餾水溶解稀釋，配制濃度為 83.7μg·mL-1 的標(biāo)準(zhǔn)溶液。
2.3.2 供試品溶液制備
稱取馬齒莧樣品粉末(過(guò) 20 目篩)10 g，按料液比 1:12.5 加入石油醚，索氏提取約 5 h，揮干乙醚，得馬齒莧脫脂樣品。
精密稱取馬齒莧脫脂樣品適量，置具塞錐形瓶中，按料液比 1:30 精密加入蒸餾水，浸泡 10 h，于 60 ℃超聲提取 25 min，取適量續(xù)濾液 5 倍稀釋后作為樣品供試液。
2.3.3 樣品含量測(cè)定
精密吸取供試液 0.1 mL 至 10 mL 容量瓶中，加入蒸餾水補(bǔ)足至 1.0 mL，苯酚-硫酸法顯色，487 nm 測(cè)定吸光度，計(jì)算藥材中多糖的含量，結(jié)果見表 2。
2.4 馬齒莧總黃酮的含量測(cè)定[9]
2.4.1 蘆丁標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備
精密稱取蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品加 75%乙醇(v/v)溶液溶解，配制成濃度為 0.205 4 mg·mL-1的標(biāo)準(zhǔn)溶液。
2.4.2 供試品溶液制備
精密稱取適量脫脂樣品，置于具塞錐形瓶中，按料液比 1∶25，精密 75%乙醇(v/v)25 mL，靜置 10 h，于 40 ℃超聲提取 80 min，過(guò)濾，取續(xù)濾液作為供試品溶液。
2.4.3 樣品含量測(cè)定
精密吸取供試液 1.0 mL 至 10 mL 容量瓶中，加入 75%乙醇補(bǔ)足至 5.0 mL，亞硝酸鈉-硝酸鋁法顯色，506 nm 處測(cè)定吸光度，計(jì)算藥材中總黃酮的含量，結(jié)果見表 2。
3 結(jié)論與討論
3.1 結(jié)論
不同產(chǎn)地的馬齒莧藥材浸出物含量不同，水浸出物和醇浸出物含量順序也不相同。水溶性浸出物變化幅度在 19.7%~35.7%(g/g)之間，由高到低依次為西安、北京、貴州、四川。醇溶性浸出物變化在 10.8%~17.0%(g/g)之間，由高到低依次為西安、貴州、四川、北京。馬齒莧中水溶性浸出物含量總體高于醇溶性浸出物，產(chǎn)于西安的馬齒莧藥材水溶性、醇溶性浸出物含量均高于其它產(chǎn)地。
相關(guān)期刊推薦：《當(dāng)代化工》(月刊)創(chuàng)刊于1972年，由中國(guó)石油撫順石化公司;中國(guó)石化撫順石油化工研究院;沈陽(yáng)化學(xué)化工學(xué)會(huì)主辦。主要報(bào)道石油和化工的前沿科技論文，及時(shí)介紹石化行業(yè)新技術(shù)、新成果、新信息、新態(tài)勢(shì)、它的辦刊宗旨：展示前沿化工，介紹新成果，鋪就成才之路，構(gòu)筑供需橋梁。有投稿需求的作者，可以直接與期刊天空在線編輯聯(lián)系。
不同產(chǎn)地的馬齒莧藥材中多糖、總黃酮含量存在較大差異，其多糖含量變化幅度為 3.54%~9.98%，由高到低依次為西安、四川、貴州、北京。總黃酮含量變化幅度為 0.77%~0.97%，由高到低依次為四川、貴州、西安、北京。兩種成分含量變化與產(chǎn)地?zé)o必然聯(lián)系。馬齒莧藥材因產(chǎn)地不同，其多糖和總黃酮含量存在較大差異，產(chǎn)地對(duì)馬齒莧中活性成分的含量有較大影響。
3.2 討論
3.2.1 活性成分、浸出物含量與馬齒莧藥材質(zhì)量的關(guān)系
馬齒莧含多種化學(xué)成分，國(guó)內(nèi)外學(xué)者已從馬齒莧中提出許多化學(xué)成分，主要包括：多糖類、黃酮類、生物堿類、有機(jī)酸類、萜類、揮發(fā)油類等，此外還含有多種蛋白質(zhì)、礦物質(zhì)、維生素、果膠等。多糖、黃酮等成分藥理作用明確。水浸出物中主要含多糖、蛋白質(zhì)、維生素、黃酮類、苷等水溶性成分，醇溶性浸出物中含游離黃酮、甾體、生物堿等成分含量較高。浸出物、活性成分的含量高低能反映馬齒莧質(zhì)量的優(yōu)劣。因此若以多糖含量做標(biāo)準(zhǔn)，西安和貴州的馬齒莧質(zhì)量較好，北京的質(zhì)量最劣;若以總黃酮含量為標(biāo)準(zhǔn)，四川的馬齒莧質(zhì)量最好，含量為 0.97%;若以水浸出物含量為標(biāo)準(zhǔn)，西安和北京的馬齒莧質(zhì)量較好;若以醇浸出物含量為標(biāo)準(zhǔn)，西安和貴州的馬齒莧質(zhì)量較好。但浸出物含量與活性成分含量并不十分吻合，西安的馬齒莧無(wú)論醇浸出物還是水浸出物的含量均為最高，但其總黃酮含量在四產(chǎn)地中僅排第三，含量只有 0.78%;水浸出物含量較高的北京產(chǎn)地的馬齒莧多糖含量卻最低，只有 3.54%。因此，評(píng)價(jià)馬齒莧質(zhì)量不能僅以浸出物含量或個(gè)別活性成分含量為依據(jù)，應(yīng)綜合評(píng)價(jià)。
3.2.2 浸出物的測(cè)定
浸出物的測(cè)定是中藥材品質(zhì)評(píng)價(jià)方法之一，測(cè)定藥物的總固體量，一般用于該藥材的活性成分或指標(biāo)性成分不清或含量很低或尚無(wú)精確的定量方法時(shí)采用。馬齒莧化學(xué)成分復(fù)雜多樣，藥理作用廣泛，單個(gè)成分的含量不能全面反應(yīng)藥材的質(zhì)量。2015 版《中國(guó)藥典》中未對(duì)馬齒莧藥材中有效成分有相關(guān)規(guī)定，本實(shí)驗(yàn)通過(guò)對(duì)馬齒莧藥材浸出物含量進(jìn)行測(cè)定，初步對(duì)其有效成分進(jìn)行研究。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，不同產(chǎn)地的馬齒莧藥材浸出物含量差異較大，西安產(chǎn)的馬齒莧藥材水溶性浸出物含量最高，四川最低，之間含量相差近二倍。醇溶性浸出物含量結(jié)果為西安最高，北京最低。水溶性浸出物含量和醇溶性浸出物含量沒(méi)有必然聯(lián)系。
因此，為了規(guī)范市場(chǎng)中馬齒莧藥材的質(zhì)量，建議藥典中對(duì)馬齒莧藥材浸出物的測(cè)定制定相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)。
3.2.3 提取方法的確定
目前對(duì)馬齒莧中多糖和黃酮化合物提取方法研究主要集中在有機(jī)溶劑提取法、超聲波法、微波法、酶解法和大孔樹脂法等。其中溶劑提取法中溶劑消耗大、提取時(shí)間長(zhǎng)，而且操作復(fù)雜;采用酶解法時(shí)酶的使用會(huì)增加提取成本;超聲波提取可極大地提高提取效率，節(jié)約溶劑，避免高溫對(duì)提取成分的影響，與常規(guī)提取法相比，具提取時(shí)間短、產(chǎn)率高、無(wú)需加熱等優(yōu)點(diǎn)[10]。因此，本實(shí)驗(yàn)選用超聲波提取法提取馬齒莧多糖和黃酮成分。此外，在試驗(yàn)過(guò)程中對(duì)比了直接超聲提取和浸潤(rùn)后超聲提取兩種方法對(duì)馬齒莧中多糖提取率的影響。結(jié)果表明，先浸潤(rùn)后超聲提取方法的多糖提取率明顯高于直接超聲提取。并對(duì)浸潤(rùn)時(shí)間做了相應(yīng)考察，結(jié)果表明，經(jīng)浸潤(rùn) 10 h 后超聲提取馬齒莧多糖提取率較高，因此，實(shí)驗(yàn)中采用浸潤(rùn) 10 h 后超聲提取的方法對(duì)馬超中多糖和黃酮化合物進(jìn)行提取。
3.2.4 馬齒莧中多糖、總黃酮含量測(cè)定結(jié)果探討
馬齒莧為《中國(guó)藥典》收載的藥材，筆者按照藥典的方法對(duì)北京、四川、貴州、西安四產(chǎn)地的馬齒莧藥材進(jìn)行了性狀鑒別、顯微鑒別、薄層鑒別、水分檢查。結(jié)果顯示，四產(chǎn)地馬齒莧質(zhì)量均符合藥典規(guī)定。但本文實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，馬齒莧中多糖、總黃酮含量存在較大差異，多糖含量為 3.54%~9.98%，總黃酮含量為 0.77%~0.97%。同時(shí)，也有文獻(xiàn)報(bào)道其他地區(qū)馬齒莧多糖、黃酮含量差異很大[11,12]，這可能是因?yàn)椴煌a(chǎn)地的氣候條件、土壤條件、地形條件和生物條件等影響因素不同，使其藥材質(zhì)量參差不齊。此外，馬齒莧中有效成分復(fù)雜多樣，《中國(guó)藥典》中對(duì)馬齒莧的成分及其含量無(wú)相關(guān)規(guī)定，建議對(duì)馬齒莧中活性成分進(jìn)行進(jìn)一步研究，并重新修訂馬齒莧質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，增加對(duì)多糖、總黃酮等活性成分的規(guī)定。
